稻米直鏈淀粉含量檢測的操作方法

在測定直鏈淀粉含量的實踐中,其關鍵步驟在于淀粉的溶解,而淀粉的溶解受多種因素影響,如樣品易粘結成團、容器壁殘留樣品、水浴時間與溫度的一致性等,從而影響測定結果的重復性和準確性。采用標準法測定時,樣品量大,很難控制水浴條件的一致性;體積大,不易操作,在酒精分散時易將樣品粘留在容量瓶壁上,容易產生誤差;過程復雜,需大量的蒸餾水和較多的其他實驗藥品等。與之比較,簡易法不僅簡化了步驟,重復性好,節省了藥品,更為主要的是用試管架1次可同時沸水浴80個樣品,保證樣品間水浴溫度和時間的一致,提高了準確性,兩人1d可完成 160多個樣品的分析測定,顯著提高了工作效率。因此, 簡易法不僅測定結果與標準法高度正相關,也表現出簡單、、準確,節省樣品和藥品等優點。因此,育種實踐中,可采用簡易法對育種早世代大群體或小樣品進行直鏈淀粉含量的篩選測定。

不同的測定人員在不同時間采用標準法構建的標準曲線,由于過程復雜和條件難以控制,一般易出現較大的偏差,每次必須單獨建立標準曲線;采用簡易法建立的標準曲線相互平行,直鏈淀粉含量誤差小于2% 。因此,該法建立的標準曲線可供以后測定人員反復使用,無需每次建立標準曲線,減少了工作量。由此可見,技術要求低和易操作性是簡易法另一大特點。

水稻胚乳含70%~80%的淀粉,其中直鏈淀粉含量的變異為0%~33%。稻米的加工、蒸煮、食味品質以及淀粉的糊化、膨脹、粘稠、可溶、消化和抗性等淀粉品質的形成與zui終用途均與直鏈淀粉含量和直鏈 P支鏈淀粉的比例有關。因此,直鏈淀粉含量一直是重要的水稻品質育種目標之一。在育種實踐中,雖已報道了一些快速測定直鏈淀粉含量的方法,但不是測定時間太長,就是不夠準確和穩定。現行的農業部米質測定方法(NY147-88),由于存在體積大和不易操作的問題,不便于育種實際利用。因此,為在育種實踐中能準確、快速、的測定大量單株或高代品系的直鏈淀粉含量,在農業部部標方法的基礎上,我們進行了簡化測定方法的研究。

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